บริเวณที่ฉีด ขนาดของกล้ามเนื้อในแต่ละตำแหน่งจะแตกต่างกัน ซึ่งเป็นปัจจัยหนึ่งที่ส่งผลต่อระยะเวลาที่ใช้ในการฉีด และทุกคนมีปัญหาเรื่องขนาดกล้ามเนื้อที่แตกต่างกัน ริ้วรอย การฉีดโบท็อกซ์บริเวณหน้าผาก รอยขมวดคิ้ว รอยตีนกา ที่เกิดจากการแสดงสีหน้า จะเริ่มเห็นผลประมาณ 3-7 วันหลังฉีด
เมื่อกล้ามเนื้อลดการเคลื่อนไหว ฉีดโบท็อกกี่วันเห็นผล ทำให้ริ้วรอยดูน้อยลงและดูอ่อนกว่าวัย สาเหตุ ที่การฉีดลดริ้วรอยได้ผลเร็วก็เพราะมัดกล้ามเนื้อตรงนี้มีขนาดเล็กลง ด้วยวิธีนี้จะสามารถเปิดเผยกลไกการออกฤทธิ์ของสารพิษโบทูลินัมได้อย่างรวดเร็ว